SALTA, 31 de noviembre de 2002




Expte. Nº 1.196/02



VISTO estas actuaciones y el Convenio Específico de Colaboración y sus Anexos 2 y 4 entre la UNIVERSIDAD NACIONAL DE SALTA y la EMPRESA MADERAS NOBLES S.A.; y


CONSIDERANDO:


QUE ambas partes tienen la intención de desarrollar en forma conjunta trabajos de investigación sobre la multiplicación de especies forestales.


QUE ASESORÍA JURÍDICA a fs. 15 informa que no tiene objeción legal que formular.


QUE la SECRETARÍA DE COOPERACIÓN TÉCNICA informa a fs. 14, que el Convenio se encuadra en el REGLAMENTO DE PRESTACIONES DE SERVICIOS, aprobado por resolución CS-Nº 433-90 y su modificatoria.


QUE a fs. 17 la COMISIÓN DE INTERPRETACIÓN Y REGLAMENTO, emite Despacho Nº 84/02 de fecha 25 de setiembre de 2002, mediante el cual aconseja su aprobación.


QUE el citado Convenio fue firmado por ambas partes el día 3 de octubre del corriente año.


Por ello y atento a lo solicitado a fs. 50, por la SECRETARÍA DE COOPERACIÓN TÉCNICA y lo dispuesto en la resolución CS-Nº 084/02,


EL RECTOR DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE SALTA

R E S U E L V E:


ARTICULO 1º.- Aprobar y poner en vigencia con efecto al 3 de octubre de 2002 Convenio Específico de Colaboración y sus Anexos 2 y 4 firmados entre la UNIVERSIDAD NACIONAL DE SALTA y la EMPRESA MADERAS NOBLES S.A., que como ANEXO I forman parte integrante de la presente resolución.


ARTICULO 2º.- Hágase saber y comuníquese a: Rectorado, Secretarías, Facultades, Sedes Regionales, Institutos de Educación Media, Dirección General de Administración y Empresa Madera Nobles S.A. Cumplido siga a la SECRETARÍA DE COOPERACIÓN TÉCNICA, para su toma de razón y demás efectos. Oportunamente Archívese.

JG

Firmado Firmado

CR. HECTOR ALFREDO FLORES DR. VICTOR OMAR VIERA

SECRETARIO ADMINISTRATIVO RECTOR

Firmado

ING. DIEGO SARAVIA ALIA

SECRETARIO DE COOP. TÉCNICA


RESOLUCIÓN – R – Nº 505-02

ANEXO


CONVENIO ESPECÍFICO DE COLABORACION

ENTRE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE SALTA

Y LA EMPRESA MADERAS NOBLES S.A.


Entre la empresa MADERAS NOBLES S.A. en adelante la EMPRESA, representado en este acto por su Presidente, Sr. Ángel SANCHIS HERRERO, con domicilio legal en calle Talcahuano 750, 9º Piso, Capital Federal, quién justifica personería con copia del Estatuto Social y la UNIVERSIDAD NACIONAL DE SALTA, en adelante la UNIVERSIDAD, representada en este acto por su Rector, Dr. Víctor Omar VIERA, con domicilio legal en Buenos Aires Nº 177, de la ciudad de Salta, acuerdan celebrar el presente CONVENIO ESPECIFICO DE COLABORACION que se regirá por las siguientes cláusulas:


PRIMERA: La UNIVERSIDAD a través de la FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES, se compromete a desarrollar la metodología para la multiplicación de especies forestales del Gén. Cedrella y de Toona mediante el cultivo in vitro ,según propuesta de la Universidad, que se adjunta como Anexo 2.


SEGUNDA: La UNIVERSIDAD desarrollará trabajos de investigación sobre la multiplicación de especies forestales. Como contraprestación la EMPRESA instalará un invernáculo de 10 x 30 metros, totalmente equipado (según se define en el Anexo 3), en el predio que la Facultad dispondrá a tal efecto, el que será cedido a la Facultad de Ciencias Naturales, una vez finalizado el proyecto.


TERCERA: La EMPRESA se compromete a proveer a la UNIVERSIDAD, en calidad de préstamo y por el tiempo que dure el proyecto, de un Equipo de Flujo Laminar Horizontal marca CASIBA modelo HL 2A clase 100 según norma Federal Standard 209D con soporte a piso, tubo germicida ( UV) y conexión lateral para gas, y de su mantenimiento, además de proveer de insumos de laboratorios y viáticos, según el requerimiento de las actividades.


CUARTA: Serán responsables del desarrollo del Convenio por la UNIVERSIDAD las docentes de las cátedras de Introducción a la Biología y Fisiología Vegetal, Lic. María Cristina BONOMO e Ing. Agr. Maritza VACCA MOLINA, respectivamente y por la EMPRESA el Lic. Horacio VALENTE.


QUINTA: En contraprestación por el desarrollo del protocolo de multiplicación in vitro de las especies forestales, la EMPRESA se hará cargo de la compra de los insumos de drogas por un monto máximo en pesos equivalente a U$S 2.000 (Dos mil dólares) e Insumos de Invernadero por monto máximo en pesos equivalente a U$S 250 (Doscientos cincuenta dólares), según la cotización del Banco Nación Argentina, vigente al momento de la compra, las que se efectuarán durante el transcurso del contrato.


SEXTA: La EMPRESA se compromete a cubrir los gastos emergentes por mantenimiento general por la suma de hasta, $ 4.000 (cuatro mil pesos), según flujo de necesidades que se elevaran en tiempo a la EMPRESA. Asimismo, la EMPRESA se compromete a remitir a la UNIVERSIDAD, copia de los comprobantes, para ser incorporados al expediente respectivo.


SÉPTIMA: La EMPRESA, en retribución a la Universidad Nacional de Salta, por la disposición de los profesionales responsables de la ejecución del proyecto, donará a la finalización del mismo el equipo de flujo laminar descrito en la cláusula tercera.


OCTAVA: La EMPRESA financiará dos becas, una destinada a actividades de laboratorio y otra a las de invernáculo, en el ámbito de la UNIVERSIDAD y por el tiempo previsto en el proyecto, hasta un máximo de $ 9.000 (nueve mil pesos). Los becarios serán seleccionados por los profesionales encargados de la ejecución del proyecto.


NOVENA: El Convenio tendrá una duración de dieciocho meses y podrá ser prorrogado si las partes así lo deciden, y podrá ser rescindido si no se cumplen los objetivos del mismo, debiendo denunciarlo en forma fehaciente con una anticipación no inferior a los treinta días.


DECIMA: OBLIGACIONES DE LA UNIVERSIDAD


Queda expresamente prohibido a la UNIVERSIDAD y/o los profesionales implicados, la posibilidad de ceder el protocolo a desarrollar en todo o en parte, ya sea a titulo oneroso o gratuito.


La UNIVERSIDAD garantiza a la EMPRESA la exclusividad y confidencialidad de la información obtenido, debiendo los profesionales firmar el compromiso de confidencialidad que se adjunta como Anexo 4.


DECIMO PRIMERA: En caso de conflicto las partes se someterán a la competencia de los Tribunales Federales de la Ciudad de Salta


En prueba de conformidad, se firman dos ejemplares de un mismo tenor y a un mismo efecto, en la ciudad de Salta a los tres días del mes de octubre del año dos mil dos.


Firmado Firmado

Sr. Ángel SANCHIS HERRERO DR. VÍCTOR OMAR VIERA

Presidente Rector

"Regeneración In vitro de especies de Gen. Cedrella" Ing. Agr. Ms. Sc. Maritza Vacca Molina

Lic. María Luisa Cristina Bonomo

Facultad de Ciencias Naturales   U.N.Sa



ANEXO 2



1. ASPECTOS DESCRIPTIVOS DEL PROYECTO



1.1. IDENTIFICACIÓN



      1. Denominación de la dependencia de la Universidad Nacional de Salta que

presenta el Proyecto:


Universidad Nacional de Salta


Facultad de Ciencias Naturales


Escuelas de Agronomía y Biología


Cátedras de Fisiología Vegetal e Introducción a la Biología


1.1.2. Denominación del Proyecto:




"Regeneración in vitro de especies del Gen. Cedrella"



1.1.3.1. Profesionales responsables:


Datos Personales:


Apellido y nombre: Vacca Molina, Maritza


Documento de Identidad: D.N.I. N° 18.735.126

"Regeneración In vitro de especies del Gen. Cedrella" Ing. Agr. Ms. Sc. Maritza Vacca Molina

LIc. María Luisa Cristina Bonomo

Facultad de Ciencias Naturales  U.N.Sa




Lugar de Trabajo: Facultad de Ciencias Naturales   Cátedra de Fisiología Vegetal

Domicilio particular: Block I  Dpto 13  Parque Belgrano 1° Etapa   Salta

Teléfono del lugar de trabajo: 0387 4255491

Teléfono particular: 0387 4252993

E mail: vaccam@unsa.edu.ar


Apellido y nombre: Bonomo de Villa, María Luisa Cristina

Documento de Identidad: D.N.I. N° 11.943.149

Lugar de Trabajo: Facultad de Ciencias Naturales   Cátedra de Introducción a la Biología Domicilio particular Rivadavia 978   Salta

Teléfono del lugar de trabajo: 0387 4255592

Teléfono particular: 0387 4317990

E mail: mbonomo@unsa.edu.ar



1.2. ANTECEDENTES


1.2.1. Actividades v. Proyectos Anteriores:


  1. Proyecto N° 331 "Multiplicación clonal de plantas aromáticas de interés agronómico para el NOA" Directora: Florence Murature de Sureda. Año 1996. Informe final aprobado.

  2. Proyecto N° 413 " Reproducción de frutales tropicales: Conservación in vitro de germoplasma". Directora: Dra. Stella Maris Pomiro. Año 1997. Informe final aprobado.

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  1. Proyecto N° 748 Propagación de Orquídeas nativas y foráneas mediante técnicas de cultivo in vitro. Directora: Bióloga Florence Murature de Sureda. Affo 2000. Con informe final en evaluación.


1.2.2. Publicaciones e Informes:

    1. Al Maarri, K, Arnaud Y. y E. Miginiac. 1994. Micropropagation of Pyrus communis cultivar “Passe Crassane” seedlings and cultivar “Willians”: factors affecting root formation in vitro and ex vitro. Scientia Horticulturae 58(1994) 207-214.

    2. Bonga, J.M. & D. J. Durzan. 1982. Tissue Culture in Forestry. Martinus Nijhoff/Dr. W. Junk Publ., The Hague, 420 pp.

    3. Bueno, M. A., Astorga, R. y J. Manzanera. 1992. Micropropagación de Populus alba “Siberia extremeña" a partir de amentos. Investigación Agraria. Sistemas y Recursos Forestales 1 (2): 163 171.

    4. Cañellas, I., Finat, L., Bachiller, A. y G. Montero. 1999. Comportamiento de planta de Pinus pinea en vivero y campo. Ensayos de técnicas de cultivo de planta, fertilización y aplicación de herbicidas. Investigación Agraria. Sistemas y Recursos Forestales 8 (2): 335 359.

    5. Chalupa, V. 1983. Micropropagation of conifer and broadleaved forest trees. Communicationes Instituti Forestalis Cechoslovenlae Volumen 13.7 39.

    6. Chalupa, V. 1998. In vitre propagation of European beech (Fagus sylvatica L.). Lesnictví   Fortestry 44(12). 529 534.

    7. Daquinta, M., Ramos, L Capote, I., Lezcano, Y., Rodríguez, R. y M. Escalona. 2002. Morfogénesis in vitro de Teca (Tectona grandis L.). Invest. Agr.: Sist. Recur. For. Vol. 11(1).

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  1. Duhoux, E.; Galiana, A.; Ahee, J. & Franche, C. 1996. In vitro propagation of the Genus Acacia. Actes de la réunion thematique sur L'acacia au Sénégal, Dakar, Senegal 3 5 december 1996.


  1. Fay, M. 1994. In what situations is in vitro culture appropriate to plant conservation. Biodiversity and Conservation 3, 176 183


  1. Le Roux, J. J. & J. Van Staden. 1991. Micropropagation of Eucalyptus Species.


  1. HortScience 26 (2): 199 200.


  1. Lee, Chiwon W., Glenn, E. & J. O'Leary. 1992. In vitro Propagation of Salicomia bigelovii by Shoot tip Cultures. HortScience 27 (5): 472


  1. Manzanera, J. A. 1992. Inducción de embriogénesis somática en roble (Quercus robur L.) Investigación Agraria. Sistemas y Recursos Forestales 1 (1): 73 81.


  1. Martínez Pastur, G. and M. Arena. 1996. In vitro propagation of Nothofagus nervosa (Phil.) Dim. et Mil. OYTON 58 (1/2): 1 7, \/1.


  1. Martínez Pulido, C. 1991. Cultivo in vitro de especies forestales. Especial referencia a las coníferas. Sociedad Española de Fisiología Vegetal. Boletín N° 16. 7 18.


  1. Pardos, J. A. 1999. Ante un cambio climático: papel de los montes arbolados y los productos forestales en la retención del carbono. Investigación Agraria. Sistemas y Recursos Forestales. Fuera de serie N° 1: 93 99.


  1. Seemann, P. 1985. El cultivo de tejidos como método de conservación de plantas en extinción. AgroSur 13 (2) 136 146.


  1. Simcha L. and R. Aloni. 1992. Experimental Induction of Dilation Meristems in Mella azedarach L. Annais of Botany 70:379 386.


  1. Valverde Cerdas L., Dufour, M. and V. Villalobos. 1997. In vitre propagation of Pithecellobium saman (raintree). In Vitro Cali Qev. Biol Plant 33:3842.


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  1. ----.1998. in vitro propagation of woody ornamentals: A review. Proceedings of the national Academy of Sciences India, Section B. Biological Sciences 68(2): 91-106.


  1. http:// www.unne.edu.ar/cyt/agrarias/a 003.pdf. Mroginski, E., Rey, H. Y. y L. Mroginski. Establecimiento in vitro de explantes y regeneración de plantas de Toona ciliata



1.3. DESCRIPCION



Objetivo General:



  1. Desarrollar protocolos de micropropagación para la multiplicación de especies del Gen. Cedrella



Objetivos Específicos:



  1. Determinar el método de micropropagación más adecuado para especies del Gen. Cedrella.


  1. Ajustar y aplicar la metodología existente, según trabajo publicado en http:// www.unne.edu.ar/cyt/agrarias/a 003.pdf. Mroginski, E., Rey, H. Y. y L. Mroginski, para especies del Gen. Toona.


  1. Estudio de las condiciones adecuadas para la aclimatación ex vitro



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1.3.1. Plan a Desarrollar



Las técnicas de cultivo in vitro comprenden una gran variedad de métodos orientados a lograr metas especificas, siendo el aspecto más significativo de estas técnicas la aplicación a la propagación asexual de las plantas con el fin de mantener las características genéticas de individuos seleccionados. En este proyecto, la multiplicación asexual mediante técnicas de cultivo in vitro, se conducirá por dos vías: a) organogénesis, y b) embriogénesis somática. La primera vía lleva a la formación de plantas mediante la ruptura de la latencia de yemas axilares o mediante la inducción de yemas adventicias. En ambos casos se obtendrán estructuras unipolares, brotes, que posteriormente deberán enraízarse. La embriogénesis somática conduce a la formación de una estructura bipolar con un eje tallo/raiz, un embrión somático, que pasa por estadios muy semejantes a los de la embriogénesis zigótica. Básicamente, la técnica consistirá en utilizar pequeños explantos, los que previa esterilización se cultivarán sobre un medio de cultivo artificial bajo condiciones de asepsia total. Los cultivos se incubarán en una cámara que permita mantener ciertas condiciones de temperatura y luminosidad. Bajo estas condiciones puede lograrse una diferenciación in vitro dentro de un periodo variable de tiempo, dependiendo de la capacidad regenerativa de la especie o genotipo, de las condiciones del tejido explantado, de la composición del medio, las condiciones ambientales, etc.

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1.3.2. Cronograma de Actividades




Descripción de tareas Primer Segundo Tercer

Semestre Semestre Semestre



Ensayo de medios de cultivos con

material proveniente de campo




Rejuvenecimiento en campo e

invernáculo de material vegetal a

introducir in vitro




Micropropagación de material

seleccionado




Ensayos preliminares de Aclimatación




- Análisis cuantitativo de datos


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1.3.3. Metodología



A. Rejuvenecimiento Uno de los mayores problemas en el uso de las técnicas de cultivo in vitro en las especies forestales, es la dificultad de manipular explantos obtenidos de árboles maduros. A medida que aumenta la edad de un árbol, más recalcitrante será su cultivo. Es más fácil propagar material juvenil que maduro por lo que necesariamente se debe recurrir al rejuvenecimiento del material a micropropagar. En el presente proyecto se ensayarán:



a) Empleo de los tejidos más juveniles de un árbol.


b) Rejuvenecimiento del donante mediante tratamientos especiales anteriores a la escición del explanto:


  1. Pulverización repetidas de ramas seleccionadas con citocininas.


  1. Injertos: injertando esquejes de árboles maduros en raíces de plántulas


  1. Combinación de injerto juvenil con pulverizaciones con citocininas


c) Etiolación de ramas antes de escindir los ápices, a los efectos de reducir la edad fisiológica


d) Subcultivos repetidos de ápices de brotes en un medio conteniendo citocininas.


e) Podas intensivas en campo.



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2.  Establecimiento de un vivero por estaquillado: utilizando soluciones auxinicas en distintas concentraciones y distintos tiempos, a efectos de inducir el desarrollo radicular de los esquejes.



B. Micropropagación Tanto para la vía organogénica como embriogénica' se cumplirán los siguientes pasos:


a. Selección de explantos: Se utilizarán hojas, yemas apicales o axilares y segmentos nodales.


b. Desinfección de explantes: Se recurrirá a soluciones de hipoclorito de calcio o de sodio, bicloruro de mercurio y peróxido de hidrógeno, variando la concentración y el tiempo de esterilización, según la solución empleada.


c. Medio de cultivo: Los medio de cultivos a emplear contendrán maco y micro nutriente, como fuente de nutrientes inorgánicos. Existe una gran cantidad de medio de cultivos diseñado por diversos autores y para fines distintos, se ensayarán aquellos medios probados en especies forestales (Murashige y Skoog  MS , Woody Plant Medium   WPM , Gresshoff y Doy  GD, Gamborg  G , etc). A estos medios salinos se adicionan compuestos orgánicos como aminoácidos y vitaminas, una fuente de carbohidratos (sacarosa ) y se empleará agar  agar como agente gelificante. Según la respuesta esperada se adicionaran distintos reguladores de crecimiento, en concentraciones acorde al tipo de respuesta a inducir.

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d. Condiciones de crecimiento: Las condiciones generales para el crecimiento de los cultivos serán: temperatura 25 + 2.0 ºC densidad de flujo fotosintéticos de fotones (DFFF) de 80 umol m 2 s 1 bajo luz blanca fluorescente con un fotoperíodo de 16 h luz y 8 h oscuridad.


e. Inicio de experiencias de aclimatamiento de las plántulas: Bajo condiciones de enraizamiento in vitro o ex vitro las plántulas se sembrarán en mezclas de suelo preparadas, mantenidas bajo un sistema de niebla intermitente, hasta lograr su establecimiento en el sustrato.


1.3.4. Alcance


En las formaciones vegetales existentes en nuestra provincia, existen una serie de especies de plantas nativas que actualmente son escasas, se encuentran en retrogresión y en algunos casos puntuales en extinción. La situación en que se encuentran estas especies tiene por origen, en algunos casos, cambios en las condiciones ecológicas, pero en la mayoría de las situaciones una negativa influencia antrópica manifestada en una sobreexplotación de los recursos naturales renovables que ha llevado a hacer peligrar la supervivencia de estas especies.

Hasta el presente se han realizado trabajos sobre multiplicación de plantas nativas mediante semillas, entendiendo que los conocimientos que se tienen sobre fisiología de la germinación en plantas autóctonas aún son insuficientes. Igualmente se dispone de pocos antecedente sobre las posibilidades de propagación vegetativa de las especies en peligro de extinción. Las técnicas de cultivo in vitro de células, tejidos y órganos de árboles forestales, otro método de propagación vegetativa, constituyen herramientas que han ido cobrando una importancia cada vez más destacada en programas de investigación relacionados con el mantenimiento y mejoras de bosques.

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1.4. GRUPO DE TRABAJO


1.4.1. Profesionales responsables


Se anexa a la presente programación el curriculum vitae de la Ing. Maritza Vacca Molina y Lic. Cristina Bonorno de Villa.


1.4.2 Personal Técnico de apoyo


Dos técnicos: Uno destinado a las actividades del laboratorio y otro a


tareas en invernáculo


1.5. RECURSOS


1.5.1. Recursos Físicos Disponibles


  1. Laboratorio de la Facultad de Ciencias Naturales   UNSa.


  1. Cámara de cría con luz y temperatura controladas.

  2. Instrumental de laboratorio (autoclave, balanzas, lupas, microscóplos ópticos, heladeras, microondas, material de vidrio, etc)

Firmado Firmado

Ing. Agr. Ms. Sc. Maritza Vacca Molina Lic. María L. C. Bonomo de Villa


ANEXO 4



Acta Complementaria de Acuerdo de



Universidad Nacional de Salta   Empresa Apresa Maderas Nobles S.A.



Los abajo firmantes, docentes responsables de la ejecución del proyecto, designados en la cláusula cuarta del convenio y becarios, se comprometen a mantener en carácter de reserva y estrictamente confidencial toda la información obtenido de la puesta a punto del protocolo de multiplicación in vitro para las especies forestales mencionadas en la cláusula primera, no pudiéndose publicar información alguna sin previa y expresa conformidad de la EMPRESA, durante un lapso de 10 años. --------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Esta acta complementaria del Acuerdo de Confidencialidad se firma entre las partes a los 14 días del mes de octubre de 2002 en dos ejemplares de un mismo tenor y a un solo efecto.             -----


Firmado Firmado

Ing. Agr. Maritza Vacca Molina Lic. María L. Cristina Bonomo de Villa